【48812】液相色谱仪器(LC)

  高效液相色谱法（英语：high performance liquid chromatography，缩写 HPLC），又译高效液相层析法，曾经曾指高压液相层析法（high pressure liquid chromatography），是一种色谱剖析技能，用来别离混合物，以承认并量化各个成分的份额。它依靠泵加压样品以令其经过填充有吸附剂的压力柱，导致样品的各个成分因此别离。高效液相色谱法常用于生物化学和剖析化学。

  1960年代，因为气相色谱对高沸点有机物剖析的局限性，为了别离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质，气相色谱的理论和办法被从头引进经典液相色谱。20世纪60年代末，科克兰（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath）、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪，敞开了高效液相色谱的年代。高效液相色谱运用粒径更细的固定相填充色谱柱，进步色谱柱的塔板数，以高压驱动活动相，使得经典液相色谱需求数日乃至数月完结的别离作业得以在几个小时乃至几十分钟内完结。1971年，科克兰等人出书了《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法（HPLC）正式树立。在尔后的时刻里，高效液相色谱成为最为常用的别离和查验测验手法，在有机化学、生物化学、医学、药物开发与检测、化工、食物科学、环境监督测定、商检和法检等方面都有广泛的运用。高效液相色谱一起还极大的影响了固定相资料、检测技能、数据处理技能和色谱理论的开展。20世纪60年代前，运用的填充粒大于100μm，进步柱效面临着窘境，后来的研讨人员便选用微粒固定相来打破这一瓶颈。科克兰、荷瓦斯制备成功薄壳型固定相，这种在固定相在玻璃微球外表具有多孔薄壳，完成了高速传质，为高效液相色谱技能的开展奠定了安定的根底。跟着填料粒径的下降，更高的柱效也得以完成。60年代研制出气动扩大泵、打针泵及低流量往复式柱塞泵，但后者的脉冲信号很大，难以满意高效液相色谱的要求。1970年代，往复式双柱塞恒流泵，处理了这一问题。1970年代后，科克兰制备出全多孔球形硅胶，均匀粒径只要7μm，具有极好的柱效，并逐步替代了无定形微粒硅胶。之后又制造出的键合固定相使柱的稳定性大为进步，屡次运用成为可能。1970年后，合适别离生物大分子的填料又成为研讨的热门。1980年后，改进别离的选择性成为色谱作业者的主体问题，人们越来越认识到改动活动相的组成是进步选择性的要害。

  高效液相层析仪依据各式各样的化工互作用力来别离混合物。这种互作用力通常是剖析物及剖析管柱之间的一种非共价性质。运用高效液相色谱时，液体待检测物在不同的时刻被注入色谱柱，经过压力在固定相中移动，因为被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质次序脱离色谱柱，经过检测器得到不同的峰信号，每个峰顶都代表一个别的化合物的品种，最终经过一系列剖析比对这些信号来判别待测物所含有的物质。以液体为活动相而规划的色谱剖析仪器称为液相色谱仪。选用高压输液泵，高效固定相和高压活络检测器等设备的液相色谱仪成为高效液相色谱仪。高效液相色谱仪品种十分之多，但不管何品种型的高效液相色谱仪，大多数都分为4个部分：高压输液设备，进样体系，别离体系和检测体系。

  高效液相色谱作为一种重要的剖析办法，广泛的运用于化学和生化剖析中，常用于医药品、化学、环保、生命科学、与食物制造业的研讨上。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有实质的不同，它的特点是选用了高压输液泵、高活络度检测器和高效微粒固定相，可将液体混合物中的成份别离、成分定性及定量剖析。适于剖析高沸点不易蒸发、分子量大、不同极性的有机物。例如：可检测剖析食物中的三聚氰胺的含量。